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ashleyoo00新蟲 (初入文壇)
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全長cDNA PCR問題 已有1人參與
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最近做了RT,然后做全長cDNA的PCR,但是一直P不出東西來,跑膠只能看到引物二聚化的條帶。 PCR有做了內(nèi)參基因,能夠P出來。 請問這是什么原因呢?? 我P的是FBXO32,引物(加了酶切位點和保護(hù)堿基)如下: FP: ATA GCGGCCGC A ATGCCATTCCTCGGGCAGGA 67℃ RP: GGCGCGCC C GCAGAACTTGAACAAGTTGATAAAGTCC 63℃ Tm值是不計算酶切位點和保護(hù)堿基序列的值。 求大神指點! |
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