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childchou銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
基因克隆求助��！ 已有2人參與
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| 小弟克隆一個(gè)新的基因在細(xì)菌中有的，然后據(jù)報(bào)道植物中也有潛在的這種基因，水稻種也報(bào)道過存在，然后我就用水稻開始做。后面做的時(shí)候pcr出來后，切膠回收轉(zhuǎn)化什么的挑單菌落pcr，電泳片段很亮而且大小和我設(shè)計(jì)引物P出來的大小一樣，但是做質(zhì)粒酶切鑒定只能看到被切開了，但是片段的大小不一樣，拿去測(cè)序比對(duì)后匹配率都小于30%。設(shè)計(jì)過3次引物了，每次都是片段大小一致但是測(cè)序都不對(duì)，求教！本人新手，連得載體是PMD19T，大腸桿菌DH5a，設(shè)計(jì)的引物沒有在兩端加酶切位點(diǎn)，想先弄出來序列對(duì)了后再加酶切位點(diǎn)然后做的， |
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biology-boy
禁蟲 (正式寫手)
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childchou(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-29 21:13:23
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2樓2014-04-29 19:54:44
zep616745243
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2014-04-29 20:26:42
childchou
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4樓2014-04-30 14:33:45
childchou
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5樓2014-04-30 14:36:03
zep616745243
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6樓2014-04-30 16:28:49
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