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childchou銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
基因克隆求助�。� 已有2人參與
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| 小弟克隆一個(gè)新的基因在細(xì)菌中有的，然后據(jù)報(bào)道植物中也有潛在的這種基因，水稻種也報(bào)道過(guò)存在，然后我就用水稻開(kāi)始做。后面做的時(shí)候pcr出來(lái)后，切膠回收轉(zhuǎn)化什么的挑單菌落pcr，電泳片段很亮而且大小和我設(shè)計(jì)引物P出來(lái)的大小一樣，但是做質(zhì)粒酶切鑒定只能看到被切開(kāi)了，但是片段的大小不一樣，拿去測(cè)序比對(duì)后匹配率都小于30%。設(shè)計(jì)過(guò)3次引物了，每次都是片段大小一致但是測(cè)序都不對(duì)，求教！本人新手，連得載體是PMD19T，大腸桿菌DH5a，設(shè)計(jì)的引物沒(méi)有在兩端加酶切位點(diǎn)，想先弄出來(lái)序列對(duì)了后再加酶切位點(diǎn)然后做的， |
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zep616745243
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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3樓2014-04-29 20:26:42
biology-boy
禁蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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2樓2014-04-29 19:54:44
childchou
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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4樓2014-04-30 14:33:45
childchou
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5樓2014-04-30 14:36:03
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