| 查看: 2552 | 回復(fù): 14 | ||||
qiushuimeng新蟲 (著名寫手)
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[求助]
已知一個啟動子序列,怎么知道它是否為特異性的? 已有5人參與
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| 如題,已經(jīng)獲得一個啟動子了,想知道它是否為特異性,是通過信息學分析呢還是通過實驗?請各位大俠幫幫我這個毫無頭緒的初學者吧?學的太差,請大家別笑話!謝謝! |
榮譽版主 (著名寫手)
一匡天下
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專家經(jīng)驗: +37 |

榮譽版主 (著名寫手)
一匡天下
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專家經(jīng)驗: +37 |
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額,這個是一種思路,不過問題在于,你的啟動子序列是不表達的啊。事實上,各個組織器官的cdna基本上涵蓋了該植物大部分的蛋白表達,除了個別特異性的以外,所以容易出現(xiàn)一個問題就是,你的這個啟動子如果不是非常特異的在某個組織表達(比如控制花粉),那么可能會在很多組織都檢測出來。 一般我們都會選擇主動出擊,就是我說的那種克隆或轉(zhuǎn)染。 當然,在這之前,你的方案是個很好而且很簡單的思路,比較快捷 如果運氣好的話,剛好非常特異,那你就中獎了哈 |

至尊木蟲 (著名寫手)
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如果是想做表達譜分析,建議克隆啟動子序列,然后加上GUS報告基因,將載體轉(zhuǎn)染你的植物,然后通過檢測GUS的活性,可以具體看哪個組織,生長發(fā)育時期的特異性表達。其實研究啟動子的方法有很多,比如酵母單雜,找蛋白與啟動子結(jié)合的特異性,EMSA研究蛋白具體 與那幾個特異堿基結(jié)合,promoter序列比對,肯定會有信息的,那種的box啊elements啊,或者其他的。 |

木蟲 (著名寫手)
新蟲 (著名寫手)
新蟲 (著名寫手)
新蟲 (著名寫手)
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