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答案24木蟲(chóng) (初入文壇)
高中
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[求助]
race的實(shí)驗(yàn) 膠回收 已有4人參與
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我最近在做race的實(shí)驗(yàn)，巢式pcr結(jié)束后，雖然說(shuō)是模帶，但是目的帶還是挺清晰的。再對(duì)pcr產(chǎn)物進(jìn)行膠回收DNA后，經(jīng)1.2%的膠檢測(cè)后。dna為什么都沒(méi)有了？ ps:膠回收時(shí)點(diǎn)樣50微升 下圖是25微升體系P的結(jié)果： marker左邊是5‘（目的片段大小200左右），右邊是3’（目的片段大小500左右） 2014-05-23 1圖.jpg |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-05-27 18:56:24
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樓主 首先，RACE的產(chǎn)物50ul怎么能全點(diǎn)呢，留一點(diǎn)可以接著用這個(gè)產(chǎn)物PCR，那條帶就會(huì)像電燈泡一樣亮； 然后，你這個(gè)電泳條帶不是很亮，膠回收損失率會(huì)達(dá)到80%，回收回來(lái)的只有2-50ng/ul而已； 最后，建議用Qiagen公司的 PCR purification Kit試劑盒，直接將PCR產(chǎn)物回收即可，回收率達(dá)到90%以上 謝謝！ |
2樓2014-05-27 16:50:12
fanbobecky
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7樓2016-04-02 00:50:27
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