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流式細(xì)胞術(shù)樣品處理 已有1人參與
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用流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)，按說(shuō)明書(shū)處理完樣品，上機(jī)時(shí)發(fā)現(xiàn)管內(nèi)有很多肉眼可見(jiàn)的顆粒，吹吸多次，震蕩，都不能弄掉，這是因?yàn)槭裁茨兀?br />
用流式檢測(cè)ROS時(shí)，rosup樣品和加藥樣品都是陰性的，且?guī)缀鯖](méi)峰，但裸細(xì)胞有很好的峰，這又是為什么呢？ 求助啊，做什么實(shí)驗(yàn)都能出現(xiàn)怪問(wèn)題。。。哎。。。 |
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zjf710
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
丫頭“笑笑”: 金幣+2, ★有幫助 2014-06-11 08:57:01
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最可能的原因：固定的時(shí)候，細(xì)胞破碎了。 細(xì)胞在凋亡的時(shí)候，細(xì)胞膜很脆弱，加上乙醇固定，如果劇烈吹吸、震蕩，細(xì)胞必然破碎成脂質(zhì)球。 說(shuō)明你的藥物誘導(dǎo)凋亡能力太強(qiáng)，建議降低藥物濃度，收集細(xì)胞時(shí)小心一些。最好用1000ul的槍頭吹吸，把250ul細(xì)胞懸液，輕輕加入750ul 95%乙醇中，再輕輕混勻。 這樣固定得到的細(xì)胞可能會(huì)好些。 祝成功！ |
2樓2014-06-10 01:36:31
3樓2014-06-10 08:48:59
zjf710
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4樓2014-06-10 13:20:30
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