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[求助]
流式細(xì)胞術(shù)樣品處理 已有1人參與
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用流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí),按說(shuō)明書處理完樣品,上機(jī)時(shí)發(fā)現(xiàn)管內(nèi)有很多肉眼可見的顆粒,吹吸多次,震蕩,都不能弄掉,這是因?yàn)槭裁茨兀?br />
用流式檢測(cè)ROS時(shí),rosup樣品和加藥樣品都是陰性的,且?guī)缀鯖]峰,但裸細(xì)胞有很好的峰,這又是為什么呢? 求助啊,做什么實(shí)驗(yàn)都能出現(xiàn)怪問(wèn)題。。。哎。。。 |


金蟲 (著名寫手)
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最可能的原因:固定的時(shí)候,細(xì)胞破碎了。 細(xì)胞在凋亡的時(shí)候,細(xì)胞膜很脆弱,加上乙醇固定,如果劇烈吹吸、震蕩,細(xì)胞必然破碎成脂質(zhì)球。 說(shuō)明你的藥物誘導(dǎo)凋亡能力太強(qiáng),建議降低藥物濃度,收集細(xì)胞時(shí)小心一些。最好用1000ul的槍頭吹吸,把250ul細(xì)胞懸液,輕輕加入750ul 95%乙醇中,再輕輕混勻。 這樣固定得到的細(xì)胞可能會(huì)好些。 祝成功! |

金蟲 (著名寫手)

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