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tsyxy421木蟲 (正式寫手)
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怎么確定已知蛋白會與什么基因的啟動子結(jié)合？ 已有5人參與
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wangpeng227
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還有種emsa遷移實驗 下面來自百度 凝膠遷移或電泳遷移率實驗（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關的DNA結(jié)合序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。 通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標記的DNA或RNA探針一同保溫，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上，分離復合物和非結(jié)合的探針。DNA-復合物或RNA-復合物比非結(jié)合的探針移動得慢。同位素標記的探針依研究的結(jié)合蛋白的不同，可是雙鏈或者是單鏈。當檢測 如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的DNA結(jié)合蛋白，可用純化蛋白，部分純化蛋白，或核細胞抽提液。在檢測RNA結(jié)合蛋白時，依據(jù)目的RNA結(jié)合蛋白的位置，可用純化或部分純化的蛋白，也可用核或胞質(zhì)細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結(jié)合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特異）， 和其它非相關的片段（非特異），來確定DNA或RNA結(jié)合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下，依據(jù)復合物的特點和強度來確定特異結(jié)合。 |
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4樓2014-06-10 09:50:58
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