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雪域塵影新蟲 (小有名氣)
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[求助]
熒光定量PCR溶解曲線問題-新手求教 已有1人參與
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各位前輩好，我是用takara的試劑盒做相對(duì)定量PCR，SYBR法，采用20ul體系，試劑盒推薦的引物濃度0.2μM，內(nèi)參用的β-actin，然后發(fā)現(xiàn)我的目的基因CT值太大了，差不多30，不好往下稀釋作標(biāo)曲；我就把引物濃度調(diào)到了0.5μM,CT值降低了一點(diǎn)。但是溶解曲線主峰前面都有一個(gè)鼓起的小包包，請(qǐng)問這樣的溶解曲線合格嗎？師姐說我的溶解曲線太丑了 ,如果不行的話，我應(yīng)該怎么調(diào)整試驗(yàn)?zāi)兀?br />
Melt Curve-β-0.5uM.jpg Melt Curve-n-0.2uM.jpg Melt Curve-n-0.5uM.jpg Melt Curve-r-0.2uM.jpg Melt Curve-r-0.5uM.jpg Melt Curve-β-0.2uM.jpg |
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胖墩兒Adolph
銅蟲 (初入文壇)
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2樓2014-06-13 15:27:46
雪域塵影
新蟲 (小有名氣)
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3樓2014-06-14 19:14:30
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