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aofeng860308木蟲 (正式寫手)
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[求助]
GST純化,洗脫時不出峰,檢測有蛋白。 已有3人參與
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如題,純化一個帶GST標簽的蛋白,裂解Buffer和平衡Buffer為PBS+5%Triton x-100,洗脫Buffer為50mM Tris-Hcl+10mM 還原型谷胱甘肽。洗脫時,不但不出峰,峰值反倒出現(xiàn)負值,而且負得很多,-2000mAU左右。將收集的樣品進行SDS-PAGE,發(fā)現(xiàn)洗脫中有目的蛋白,只是量不多。 想請教一下大神們,為什么會不出峰,反而會出現(xiàn)負值,之前純化過的都是正常的。 |
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