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aofeng860308木蟲 (正式寫手)
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[求助]
GST純化，洗脫時(shí)不出峰，檢測(cè)有蛋白。 已有3人參與
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如題，純化一個(gè)帶GST標(biāo)簽的蛋白，裂解Buffer和平衡Buffer為PBS+5%Triton x-100，洗脫Buffer為50mM Tris-Hcl+10mM 還原型谷胱甘肽。洗脫時(shí)，不但不出峰，峰值反倒出現(xiàn)負(fù)值，而且負(fù)得很多，-2000mAU左右。將收集的樣品進(jìn)行SDS-PAGE，發(fā)現(xiàn)洗脫中有目的蛋白，只是量不多。 想請(qǐng)教一下大神們，為什么會(huì)不出峰，反而會(huì)出現(xiàn)負(fù)值，之前純化過的都是正常的。 |
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pudding9696
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6樓2014-07-04 14:18:17
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4樓2014-06-17 21:03:44
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