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aofeng860308木蟲 (正式寫手)
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[求助]
GST純化，洗脫時不出峰，檢測有蛋白。 已有3人參與
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如題，純化一個帶GST標(biāo)簽的蛋白，裂解Buffer和平衡Buffer為PBS+5%Triton x-100，洗脫Buffer為50mM Tris-Hcl+10mM 還原型谷胱甘肽。洗脫時，不但不出峰，峰值反倒出現(xiàn)負(fù)值，而且負(fù)得很多，-2000mAU左右。將收集的樣品進(jìn)行SDS-PAGE，發(fā)現(xiàn)洗脫中有目的蛋白，只是量不多。 想請教一下大神們，為什么會不出峰，反而會出現(xiàn)負(fù)值，之前純化過的都是正常的。 |
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6樓2014-07-04 14:18:17
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