 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2986 | 回復: 15 | |||
zhaoxinrui0511金蟲 (小有名氣)
|
[求助]
如何獲得含有內(nèi)含子基因的完整cDNA序列？ 已有4人參與
|
||
|
我要擴增的是一個黑曲霉基因（含有兩段內(nèi)含子）的cDNA序列，基因結構是這樣的： 1-186是外顯子（186 bp） 187-232是內(nèi)含子 233-313是外顯子（81 bp） 314-362是內(nèi)含子 363-1583是外顯子（1221 bp） 之前嘗試了分別用PCR擴增三段外顯子，再用融合PCR的方法連接，但由于前兩個外顯子片段太短而失敗了， 請問有其他什么好辦法嗎？ |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有83人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- RNA 反轉(zhuǎn)錄后 還有內(nèi)含子？
已經(jīng)有14人回復
- 如何找基因組中的外顯子和內(nèi)含子？
已經(jīng)有13人回復
- 急求：分析外顯子和內(nèi)含子的軟件??
已經(jīng)有8人回復
- 用擴增cDNA的引物擴增基因組DNA
已經(jīng)有18人回復
- 已知一個基因的DNA序列，怎么得到它的cDNA序列，我想做RT-PCR
已經(jīng)有6人回復
- 引物設計 基因全長的獲得
已經(jīng)有13人回復
- 如何插入內(nèi)含子到目的基因？
已經(jīng)有5人回復
- 在NCBI里搜索到a基因多條序列，如何確定該基因的序列？
已經(jīng)有9人回復
- 如何進行基因中外顯子和內(nèi)含子的分析
已經(jīng)有11人回復
- 以cDNA為模板為什么能擴出內(nèi)含子？
已經(jīng)有13人回復
- 如何獲得基因組序列
已經(jīng)有5人回復
- 基因序列比對 內(nèi)含子比對
已經(jīng)有8人回復
- 請問，用基因組DNA和cDNA做模板進行PCR有什么區(qū)別呀？
已經(jīng)有6人回復
- RT-PCR模板問題。
已經(jīng)有3人回復
- 對于一個沒有內(nèi)含子的基因，請問用基因組或cDNA作為模板跑PCR對于結果有什么影響嗎？
已經(jīng)有11人回復
- cDNA序列分析，用什么軟件做出這樣的效果來呢？
已經(jīng)有13人回復
- 【求助】用cDNA的ORF序列以基因組DNA為模板 做PCR 為何P不出其對應的基因組序列?
已經(jīng)有8人回復
- 怎么能設計出跨內(nèi)含子的引物？
已經(jīng)有6人回復
- 如何確定cDNA中是否還含有基因組DNA？
已經(jīng)有7人回復
- 【求助/交流】那位大蝦幫忙好好解釋一下CDS和cdna的區(qū)別和聯(lián)系？？
已經(jīng)有17人回復
- 【求助/交流】是否所有的基因都有內(nèi)含子？
已經(jīng)有11人回復
lone007
捐助貴賓 (正式寫手)
- 應助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 2499.3
- 散金: 216
- 紅花: 2
- 帖子: 311
- 在線: 117.1小時
- 蟲號: 3074445
- 注冊: 2014-03-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤診斷
5樓2014-06-22 11:58:23
lone007
捐助貴賓 (正式寫手)
- 應助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 2499.3
- 散金: 216
- 紅花: 2
- 帖子: 311
- 在線: 117.1小時
- 蟲號: 3074445
- 注冊: 2014-03-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤診斷
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2014-06-22 11:32:34
zhaoxinrui0511: 金幣+2, ★★★很有幫助, 不好意思，可能是我沒表述清楚，我需要的是沒有內(nèi)含子的基因序列，除了RT之外，還有其他的方法嗎 2014-06-22 16:08:03
感謝參與，應助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2014-06-22 11:32:34
zhaoxinrui0511: 金幣+2, ★★★很有幫助, 不好意思，可能是我沒表述清楚，我需要的是沒有內(nèi)含子的基因序列，除了RT之外，還有其他的方法嗎 2014-06-22 16:08:03
| cDNA的定義是：以成熟mRNA為模板在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成DNA單鏈，之后在DNA聚合酶的作用下合成的雙鏈DNA。成熟的mRNA是不含有內(nèi)含子的，因此，cDNA可以視為是基因組全部外顯子的集合，無論你怎么擴都不會包含內(nèi)含子。 |
2樓2014-06-22 08:42:49
這是馬甲
至尊木蟲 (著名寫手)
誰的馬甲都不是
- 應助: 7 (幼兒園)
- 貴賓: 0.05
- 金幣: 12399.7
- 散金: 2177
- 紅花: 12
- 沙發(fā): 107
- 帖子: 2142
- 在線: 1269.6小時
- 蟲號: 1319965
- 注冊: 2011-06-10
- 專業(yè): 動物遺傳學
4樓2014-06-22 09:56:42
cm8002
金蟲 (小有名氣)
- 應助: 11 (小學生)
- 金幣: 3615.3
- 紅花: 3
- 帖子: 105
- 在線: 162.6小時
- 蟲號: 2482047
- 注冊: 2013-05-26
- 專業(yè): 自身免疫性疾病
★ ★
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！ 2014-07-15 21:41:54
gyesang: 金幣+2, 鼓勵回帖交流！ 2014-07-15 21:41:54
|
就按照你之前融合PCR的作法 第一段可以用引物擴出來 第二段合成兩條長引物相互退火延伸就行 再將前兩段先融合 最后剩下的就好辦了吧 但是這樣步驟比較多 費事 要是有錢干脆買個反轉(zhuǎn)錄試劑盒 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
zhaoxinrui051114樓2014-06-23 00:30:39
liuderong
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應助: 310 (大學生)
- 金幣: 8202.1
- 紅花: 31
- 帖子: 582
- 在線: 142.1小時
- 蟲號: 1882145
- 注冊: 2012-07-07
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學
3樓2014-06-22 09:35:36
jurkat.1640
至尊木蟲 (文壇精英)
- MolEPI: 1
- 應助: 908 (博后)
- 金幣: 17152.7
- 散金: 1654
- 紅花: 121
- 沙發(fā): 41
- 帖子: 14520
- 在線: 2183.9小時
- 蟲號: 514340
- 注冊: 2008-02-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學
6樓2014-06-22 12:23:29
曾文正公
金蟲 (著名寫手)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 4564.3
- 紅花: 6
- 帖子: 1936
- 在線: 626.5小時
- 蟲號: 2161228
- 注冊: 2012-12-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)生物學
7樓2014-06-22 13:49:16
zhaoxinrui0511
金蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 791.3
- 散金: 14
- 紅花: 1
- 帖子: 95
- 在線: 75小時
- 蟲號: 272729
- 注冊: 2006-08-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 食品科學基礎
8樓2014-06-22 16:05:02
zhaoxinrui0511
金蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 791.3
- 散金: 14
- 紅花: 1
- 帖子: 95
- 在線: 75小時
- 蟲號: 272729
- 注冊: 2006-08-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 食品科學基礎
9樓2014-06-22 16:06:12
zhenwuhuang
至尊木蟲 (文學泰斗)
- 應助: 4351 (副教授)
- 金幣: 10192.3
- 散金: 1
- 紅花: 137
- 帖子: 65925
- 在線: 2433.9小時
- 蟲號: 2227382
- 注冊: 2013-01-07
- 性別: GG
- 專業(yè): 人類營養(yǎng)
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
zhaoxinrui0511: 金幣+13, ★有幫助, 1 2014-06-22 21:36:47
感謝參與，應助指數(shù) +1
zhaoxinrui0511: 金幣+13, ★有幫助, 1 2014-06-22 21:36:47
|
應用NCBI查找連續(xù)的mRNA(含內(nèi)含子)、cDNA、蛋白序列 http://www.doc88.com/p-676405989477.html |
10樓2014-06-22 16:30:39
相關版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 zhaoxinrui0511 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +6 | lemonzzn 2026-03-16 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +3 | 申子申申 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿西安交通大學材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑 +5 | 楓橋ZL 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 能源材料化學課題組招收碩士研究生8-10名 +4 | 脫穎而出 2026-03-16 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 一志愿京區(qū)211 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +5 | 陽陽哇塞 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 收復試調(diào)劑生 +4 | 雨后秋荷 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 26考研求調(diào)劑 +6 | 丶宏Sir 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +6 | 孔志浩 2026-03-12 | 11/550 |
|
|
|
[考研] [導師推薦]西南科技大學國防/材料導師推薦 +3 | 尖角小荷 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703一志愿211 285分求調(diào)劑 +5 | ly3471z 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +3 | 劉夢微 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑 +3 | Zys010410@ 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大材料324分求調(diào)劑 +5 | 閆旭東 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 是Lupa啊 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學學碩310找調(diào)劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|