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往事F隨風(fēng)新蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于PCR引物設(shè)計(jì)的求助 已有3人參與
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鄙人新手一枚，很多東西都不懂，所以來 求助了。 PCR引物設(shè)計(jì)有什么技巧啊？之前也看了很多資料，關(guān)于PCR引物設(shè)計(jì)的原則，比如CG含量在40-60%，溫度在58-60,℃為宜等等初步判斷PCR一對引物的優(yōu)劣，但是我們一位師姐建議我們，說PCR引物設(shè)計(jì)時，一點(diǎn)引物二聚體、錯誤配對都不要有（我用的primer5.0軟件），但是我發(fā)現(xiàn)熊掌和魚往往不能兼得，考慮到CG，溫度等，一般設(shè)計(jì)時會出現(xiàn)二聚體，只是能值還是比較低的（δG<9），或者出現(xiàn)錯誤配對，如果考慮二聚體等，CG含量一般又比較低。在此我想向大神們請教下，這種情況下，我如何選擇呢？是不是在做熒光定量引物時，一點(diǎn)二聚體什么的都不能有？ |
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8樓2014-07-20 21:14:13
妳口妳口
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 1755.5
- 帖子: 86
- 在線: 100.1小時
- 蟲號: 1045711
- 注冊: 2010-06-22
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
2樓2014-06-22 09:36:04
3樓2014-06-24 14:40:39
4樓2014-06-24 17:13:19
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