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哈圖薩斯90銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
分子克隆效率求助!各種載體構(gòu)建 已有4人參與
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在做分子克隆方面的實(shí)驗(yàn),無(wú)論使用傳統(tǒng)的酶切酶連、同源重組或者Gateway的方法構(gòu)建表達(dá)載體的時(shí)候,總是遇到某一段時(shí)間效率特別高,很快就能成功構(gòu)建所需要的載體,但是某一段時(shí)間一點(diǎn)效率都沒(méi)有的情況。一般來(lái)講每年的2、3月份成功率比較高,其他時(shí)間段幾乎可以說(shuō)是完全失敗的。這個(gè)問(wèn)題已經(jīng)困擾了我們很久了,實(shí)驗(yàn)室里的其他人也都遇到過(guò)。 希望大家多幫忙出出主意,最近很急!! 謝謝了! |
新蟲(chóng) (初入文壇)
銅蟲(chóng) (初入文壇)
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“一般來(lái)講,每年的2-3月份比較高” 請(qǐng)問(wèn)你在這個(gè)實(shí)驗(yàn)室待了幾年?你是怎么得出這個(gè)看法的。 或許今年2-3月份你做載體構(gòu)建的時(shí)候,效率很高。去年2-3月份你也在做載體構(gòu)建?前年2-3月份你還在做載體構(gòu)建? 我做實(shí)驗(yàn)有一個(gè)原則:當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性,看陽(yáng)性對(duì)照。 也就是當(dāng)實(shí)驗(yàn)做不出來(lái)的時(shí)候,特別是應(yīng)該做得來(lái)的實(shí)驗(yàn),我會(huì)設(shè)置各種對(duì)照排除原因。 酶、感受肽、質(zhì)粒提取、膠回收等都是可以設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證它們是否好用的。 |
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