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yueyue0520

金蟲 (小有名氣)

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專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)

[求助] 簡化巰基試劑測巰基含量的方法

本人想測定MT提取液中巰基含量，打算用簡化巰基試劑的方法但是查到的文獻(xiàn) 方法如下：

巰基試劑的配置：稱取 DTNB 0.0594 g，鹽酸胍 0.0172 g，EDTA 0.0112 g 用 0.1 mol/L PBS 試劑
溶解定容至 100 mL。
將樣品配成 100 uL 溶液，加入 20 uL 1.2 mol/L HCl 和 400 uL 0.1 mol/L EDTA 反應(yīng) 10 min 去除金
屬，加入 200 uL 巰基試劑，混勻 3 min 使 MT 變性后與 DTNB 形成黃色絡(luò)合物，用 0.1 mol/L PBS pH7.3
稀釋至 6 mL，在 412 nm 處測紫外吸收值。用 C=DA/ε（ε=1.23×104（mol/L）-1·cm-1）測算巰基濃度。
想請教各位大俠這個方法的可行性，以及公式中的D及A代表的含義。A是吸光度值嗎那么D呢？
請做過相關(guān)課題的大俠們多多指教謝謝！

回復(fù)此樓

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1樓 2014-06-25 00:44:27

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