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elinor7新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
定量PCR和巢式PCR 已有2人參與
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| 我想做實(shí)施熒光定量PCR，但是樣本中核酸含量過(guò)低，只有巢式PCR能擴(kuò)出來(lái)，有文獻(xiàn)說(shuō)可以將巢式PCR和定量PCR結(jié)合起來(lái)，先設(shè)計(jì)外套引物進(jìn)行第一次PCR,然后將第一次PCR產(chǎn)物稀釋作為定量PCR的模板，定量PCR用的是內(nèi)套引物。我的問(wèn)題是：這樣的話是對(duì)第一輪PCR產(chǎn)物進(jìn)行定量，那么怎么能知道原來(lái)樣本中的我所檢測(cè)的基因含量呢？哪位大俠指導(dǎo)一下啊 |
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飛約瘋?cè)嗽?/a>
專家顧問(wèn) (著名寫(xiě)手)
科學(xué)怪人
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2014-07-01 11:24:11
elinor7: 金幣+4, ★★★很有幫助 2014-07-28 15:20:28
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elinor7: 金幣+4, ★★★很有幫助 2014-07-28 15:20:28
| 你的問(wèn)題和我的一樣，但從我后來(lái)詢問(wèn)的結(jié)果看來(lái)，普通PCR如果用巢式，就不能再做定量PCR了，因?yàn)橐呀?jīng)進(jìn)行了一輪擴(kuò)增之后，產(chǎn)物的量與原來(lái)模板的量已經(jīng)不是一一對(duì)應(yīng)的關(guān)系了 |
2樓2014-07-01 09:48:54
taccycle
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3樓2014-07-01 15:13:50
4樓2014-07-20 20:51:13
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