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ylian0木蟲 (小有名氣)
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[求助]
不知道我的多重PCR哪里出問題了？請高手指教！ 已有1人參與
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根據(jù)參考文獻進行的PCR擴增，陽性菌株條帶正常，待測菌株有一些正常檢出，一些只能檢測出部分基因。 25μl反應體系，用的takara的預混酶，94℃，4min。94℃，30s；59℃，30s；72℃，45s--10循環(huán)。94℃，30s；52℃，30s；72℃，45s--25循環(huán)。72℃，10min。 我檢測的目的基因有金黃色葡萄球菌16s基因（756bp），耐甲氧西林mecA基因(310bp)。 MARKER條帶從上到下分別為：1000,700,500,400,300,200,100. 1-6號都是金黃色葡萄球菌，1、2號都有16s的目的條帶，但是3-6號只有mecA基因的擴增條帶（我用單重PCR方法單獨擴增16s，可以擴增得到所有的目的條帶） 請問大家有什么改進的建議呢？ 圖片1.png |
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yuren2009
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ylian0
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3樓2014-07-03 08:14:36
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