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ylian0木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
不知道我的多重PCR哪里出問(wèn)題了？請(qǐng)高手指教！ 已有1人參與
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根據(jù)參考文獻(xiàn)進(jìn)行的PCR擴(kuò)增，陽(yáng)性菌株條帶正常，待測(cè)菌株有一些正常檢出，一些只能檢測(cè)出部分基因。 25μl反應(yīng)體系，用的takara的預(yù)混酶，94℃，4min。94℃，30s；59℃，30s；72℃，45s--10循環(huán)。94℃，30s；52℃，30s；72℃，45s--25循環(huán)。72℃，10min。 我檢測(cè)的目的基因有金黃色葡萄球菌16s基因（756bp），耐甲氧西林mecA基因(310bp)。 MARKER條帶從上到下分別為：1000,700,500,400,300,200,100. 1-6號(hào)都是金黃色葡萄球菌，1、2號(hào)都有16s的目的條帶，但是3-6號(hào)只有mecA基因的擴(kuò)增條帶（我用單重PCR方法單獨(dú)擴(kuò)增16s，可以擴(kuò)增得到所有的目的條帶） 請(qǐng)問(wèn)大家有什么改進(jìn)的建議呢？ 圖片1.png |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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ylian0
木蟲(chóng) (小有名氣)
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3樓2014-07-03 08:14:36
yuren2009
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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2樓2014-07-02 17:16:53
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