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請教關(guān)于PAGE膠跑DNA問題 已有1人參與
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請教幾點關(guān)于PAGE膠跑DNA問題: 1 100-700bp的DNA用PAGE膠濃度多大為好? 2 丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺比例多少為好?29:1 or 37.5:1 3 跑完的膠用stain dye 或者gel red (1:10000)染色20min,條帶會有拖尾,有時候膠孔有滯留的東東,是什么原因呢?(樣品中有DNA和蛋白和離子),謝謝 |
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聚丙烯酰胺凝膠孔徑的大小是由丙烯酰胺的濃度決定的,不同濃度丙烯酰胺和DNA的 有效分離范圍見表 丙烯酰胺(%) 有效分離范圍(bp) 3.5 100~2000 5.0 80~500 8.0 60~400 12.0 40~200 15.0 25~150 20.0 10~100 所以想達到對DNA最佳分辨,與膠的濃度和合適的電壓,電泳時間有關(guān).不能絕對的說濃度越高,分辨的越好,因為電壓和電泳時間也很重要,建議您看一下這個鏈接http://www.technew.cn/?m=news&s=newsd&id=6900 |


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