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2009442038新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請(qǐng)教關(guān)于PAGE膠跑DNA問(wèn)題 已有1人參與
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請(qǐng)教幾點(diǎn)關(guān)于PAGE膠跑DNA問(wèn)題： 1 100-700bp的DNA用PAGE膠濃度多大為好？ 2 丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺比例多少為好？29:1 or 37.5:1 3 跑完的膠用stain dye 或者gel red （1:10000）染色20min，條帶會(huì)有拖尾，有時(shí)候膠孔有滯留的東東，是什么原因呢？（樣品中有DNA和蛋白和離子），謝謝 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
laozuzunzhe: 金幣+1, 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2014-07-19 20:51:33
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laozuzunzhe: 金幣+1, 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2014-07-19 20:51:33
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聚丙烯酰胺凝膠孔徑的大小是由丙烯酰胺的濃度決定的，不同濃度丙烯酰胺和DNA的 有效分離范圍見(jiàn)表 丙烯酰胺(%) 有效分離范圍(bp) 3.5 100～2000 5.0 80～500 8.0 60～400 12.0 40～200 15.0 25～150 20.0 10～100 所以想達(dá)到對(duì)DNA最佳分辨,與膠的濃度和合適的電壓,電泳時(shí)間有關(guān).不能絕對(duì)的說(shuō)濃度越高,分辨的越好,因?yàn)殡妷汉碗娪緯r(shí)間也很重要,建議您看一下這個(gè)鏈接http://www.technew.cn/?m=news&s=newsd&id=6900 |
2樓2014-07-19 15:41:47
2009442038
新蟲 (初入文壇)
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3樓2014-07-21 20:29:01
4樓2014-07-21 22:06:20
2009442038
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5樓2014-07-22 20:28:23
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