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wuweifeng710木蟲 (正式寫手)
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[求助]
CTAB法提DNA,沉淀DNA有漂亮的絮狀物,提取完電泳卻什么都沒有,大家來幫幫忙 已有8人參與
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最近一直在用CTAB法提DNA,沉淀DNA有漂亮的絮狀物,用75%的乙醇洗沉淀2次,用TE溶解后,37攝氏度水浴30min,表現為溶液粘稠,完后電泳卻什么都沒有,連點樣孔都沒有亮,估計是多糖污染,但為什么點樣孔一點亮都沒有,有點marker,marker表現很正常,我沉淀完dna的后續(xù)操作是這樣的 1.用異丙醇沉淀DNA,出現絮狀物(有用過無水乙醇沉淀,也是有沉淀,電泳完什么也沒看到),4℃下5000rpm離心5分鐘 2.棄上清,用75%乙醇洗沉淀,5000rpm離心1min,重復1次 3.在超凈工作臺抽干乙醇(大約15分鐘左右) 4.TE溶解,加少許RNase水浴30~60min 5.跑膠(有嘗試水浴完直接跑膠,也有在室溫下或4℃下過夜后跑膠) 大家來幫幫忙!幫我找找原因,謝謝大家了 |


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