 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1547 | 回復(fù): 9 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
sunyu65045木蟲 (初入文壇)
|
[求助]
A-T克隆重組質(zhì)粒篩選 菌落PCR 已有2人參與
|
|
| 我使用pMD19-T對(duì)1600bp基因片段進(jìn)行A-T克隆，在含有Amp的LB平板上長(zhǎng)有少量的菌落，分別挑取半個(gè)菌落進(jìn)行菌落PCR，但是電泳確認(rèn)是發(fā)現(xiàn)所有菌落的條帶均一致但都小于目的片段（小于1000bp），PCR所用試劑均沒(méi)有問(wèn)題以前使用過(guò)，請(qǐng)高手指教是哪里出現(xiàn)了問(wèn)題，萬(wàn)分感謝�。。。�！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有137人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 質(zhì)粒PCR產(chǎn)物片段大小問(wèn)題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 質(zhì)粒構(gòu)建，挑單菌落驗(yàn)證總是假陽(yáng)性，求分析原因？！
已經(jīng)有29人回復(fù)
- PCR產(chǎn)物做克隆，菌液涂平板后長(zhǎng)得很慢是什么原因？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 如何檢測(cè)目的片段轉(zhuǎn)沒(méi)轉(zhuǎn)到質(zhì)粒上？
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 菌落PCR有目的條帶，重組質(zhì)粒提取PCR卻沒(méi)條帶，請(qǐng)問(wèn)是什么原因？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 用的pCDNA-5重組質(zhì)粒，通過(guò)測(cè)序檢驗(yàn)質(zhì)粒+目的基因是否構(gòu)建成功
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 大神救命�。�！菌液PCR 出來(lái)酶切質(zhì)粒沒(méi)有目的條帶
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 挑取單克隆后的PCR驗(yàn)證
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 質(zhì)粒測(cè)序 pcr產(chǎn)物ta克隆后送去測(cè)序 為什么要測(cè)雙向
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 菌落PCR使用的通用引物序列是什么？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 誠(chéng)心求教各位前輩：篩選擴(kuò)增體系時(shí)的PCR圖片，這是怎么回事��？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 藍(lán)白斑篩選白色菌落PCR無(wú)條帶
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 我用sal Ⅰ和xho Ⅰ雙酶切鏈接目的基因，菌落pcr能p出目的條帶，但酶切切不開。
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 目的基因連接到克隆載體后提取質(zhì)粒測(cè)序，序列有問(wèn)題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 連接轉(zhuǎn)化后挑菌落，測(cè)序是混合克隆，是怎么回事？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 菌液pcr出來(lái)后，質(zhì)粒提不出，測(cè)序老失��？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 菌液PCR是陽(yáng)性，卻提不出來(lái)陽(yáng)性質(zhì)粒！求助
已經(jīng)有31人回復(fù)
- pcr產(chǎn)物測(cè)序和克隆之后重組質(zhì)粒測(cè)序結(jié)果一樣嗎？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- PCR鑒定與酶切鑒定
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 求PCR解！謝謝！
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化后菌落PCR正確，提取的質(zhì)粒卻比空質(zhì)粒還小？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助/交流】怎樣區(qū)分空載和重組質(zhì)粒？
已經(jīng)有9人回復(fù)
sunyu65045
木蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3821
- 帖子: 27
- 在線: 11.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 2711122
- 注冊(cè): 2013-10-10
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
7樓2014-08-08 12:24:07
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-08-06 23:03:59
sunyu65045: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-08-07 15:13:13
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-08-06 23:03:59
sunyu65045: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-08-07 15:13:13
|
-你確定在基因片段兩端加上3‘A了么。如果沒(méi)有，可以用Taq酶加3’A再連接。 -pMD19-T應(yīng)該是可以做藍(lán)白斑篩選的吧，建議用LB AMP板加上IPTG+X-Gal做藍(lán)白斑篩選，挑白斑做PCR。白斑的插入率應(yīng)該有90%以上。 如果你現(xiàn)在已有LB AMP板，只需要加 100μl的100mM IPTG和 20μl的50mg/ml X-Gal在板上，涂抹均勻后37°C放置半個(gè)小時(shí)吸收IPTG和X-Gal，然后就可以用轉(zhuǎn)化菌液涂板了。 |
2樓2014-08-06 18:23:16
馨-馨
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 135.4
- 散金: 34
- 帖子: 115
- 在線: 55.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 1390789
- 注冊(cè): 2011-09-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2014-08-06 21:57:58
sunyu65045
木蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3821
- 帖子: 27
- 在線: 11.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 2711122
- 注冊(cè): 2013-10-10
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
4樓2014-08-07 15:15:25
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +7 | 呢呢妮妮 2026-04-01 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +14 | 一樣YWY 2026-04-01 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)求調(diào)劑 +13 | 小黃鴨寶 2026-03-30 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 生物與醫(yī)藥考研調(diào)劑 +5 | 鐵憨憨123425 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 08工科275分求調(diào)劑 +12 | AaAa7420 2026-03-31 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +9 | hyzzzzzzz. 2026-04-01 | 9/450 |
|
|
[考研] 311求調(diào)劑一志愿合肥工業(yè)大學(xué) +14 | 秋二十二 2026-03-30 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師范361分，化學(xué)求調(diào)劑 +4 | Nicole88888 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085900土木水利336分求調(diào)劑 +3 | Zhangjiangj 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +9 | akdhjs 2026-03-31 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +8 | 愛(ài)羈絆 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 367求調(diào)劑 +7 | 芋泥啵啵… 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 本科211生物醫(yī)學(xué)工程085409求調(diào)劑339分 +7 | 里子木yy 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | 11ggg 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考博] 材料專業(yè)申博 +5 | 杜雨婷dyt 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料化工340求調(diào)劑 +3 | jhx777 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科新能源科學(xué)與工程，一志愿華理能動(dòng)285求調(diào)劑 +3 | AZMK 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 331環(huán)境科學(xué)與工程求調(diào)劑 +3 | 熠然好運(yùn)氣 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 330一志愿中國(guó)海洋大學(xué) 化學(xué)工程 085602 有讀博意愿 求調(diào)劑 +3 | wywy.. 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | jjjjjjjjjjl 2026-03-27 | 10/500 |
|