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Insecta_A

銅蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] 請(qǐng)教DNA電泳的濃度及電壓時(shí)間設(shè)置已有5人參與

大家好，我PCR產(chǎn)物預(yù)計(jì)大小在90—200左右，請(qǐng)問(wèn)我用瓊脂糖電泳時(shí)膠的濃度選擇多少？同時(shí)電泳時(shí)的電壓以及時(shí)間？謝謝！

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【求助/交流】DNA電泳圖求助！（有圖）已經(jīng)有21人回復(fù)
【求助/交流】請(qǐng)教一個(gè)DNA電泳的問(wèn)題已經(jīng)有14人回復(fù)

1樓 2014-08-13 08:58:53

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盛夏海棠

木蟲(chóng) (初入文壇)

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PCR產(chǎn)物片段越小跑的越快，需要用濃度高些的膠，2%就可以，電壓高的話(huà)跑的也快，一般loading buffer會(huì)有指示作用，一般跑到膠的一半時(shí)就可以看結(jié)果了

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天道酬勤

3樓2014-08-13 09:18:01

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ssssllllnnnn

至尊木蟲(chóng) (知名作家)

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用2%～2.5%便可。
電壓90V就可以了，不要太高。
時(shí)間半小時(shí)內(nèi)（20～30min應(yīng)該就可以了，可以經(jīng)�？纯矗�

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2樓2014-08-13 09:14:59

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ncuduhan

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瓊脂糖濃度/％ 0.3 0.6 0.7 0.9 1.2 1.5 2.0
線(xiàn)狀DNA大小/kb 60－5 20－1 10－0.8 7－0.5 6－0.4 4－0.2 3－0.1

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4樓2014-08-13 12:13:45

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Insecta_A

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引用回帖:

2樓: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-13 09:14:59
用2%～2.5%便可。
電壓90V就可以了，不要太高。
時(shí)間半小時(shí)內(nèi)（20～30min應(yīng)該就可以了，可以經(jīng)�？纯矗�

請(qǐng)問(wèn)，我一般用微波爐中火打2分鐘左右，我感覺(jué)微波爐在加熱的時(shí)候會(huì)蒸發(fā)，如果做2%的膠（0.7g+35ml 1X TAE）是不是真實(shí)的膠濃度就會(huì)高一些，所以我想請(qǐng)問(wèn)你平時(shí)在做的時(shí)候，大概會(huì)多加多少ml的緩沖液來(lái)彌補(bǔ)蒸發(fā)的損失？

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5樓2014-08-22 10:30:01

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