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[交流]
純化蛋白質(zhì)問(wèn)題 已有4人參與
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我的蛋白質(zhì)等電點(diǎn)大約是5.6，做純化蛋白質(zhì)時(shí)用的裂解液為PH 8.0的tris緩沖液，300ml菌液加入了10ml的裂解液，超聲破碎30min.然后直接過(guò)濾進(jìn)行鎳柱純化，過(guò)鎳柱時(shí)用的是咪唑梯度為25，50，100，150，250的tris緩沖液,pH=8.0。 圖一是進(jìn)行的蛋白質(zhì)可溶性分析，上清中含量較高。為什么一經(jīng)過(guò)鎳柱蛋白幾乎就沒(méi)有了呢？圖2為過(guò)鎳柱的圖 蛋白質(zhì)可溶性分析圖片1.png 純化蛋白圖片2.png |
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