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devil_liu銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
血漿蛋白沉淀后放置在進(jìn)樣小瓶半小時(shí)后仍然產(chǎn)生沉淀 已有6人參與
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做藥代動(dòng)力學(xué)，前處理用蛋白沉淀，沉淀劑用含1%甲酸的-甲醇/乙腈（1:1）混合液，體積為血漿的3倍。沉淀后渦旋，高速離心，取上清進(jìn)樣，但發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣小瓶放置半小時(shí)后會(huì)產(chǎn)生沉淀，達(dá)不到進(jìn)樣的要求。如果用甲醇/乙腈（1:1）混合液沉淀，不加甲酸的話（不加甲酸會(huì)影響峰形），放置半小時(shí)后就不會(huì)產(chǎn)生沉淀。 我自己猜想的原因： 1.我的微孔濾膜用的是有機(jī)相0.22微米的尼龍66材質(zhì)，上網(wǎng)查詢它遇到100%甲酸會(huì)溶解，但我的條件是1%甲酸。有沒有耐酸的微孔濾膜？？ 特來求助，請(qǐng)高手給予建議。在線等，O(∩_∩)O謝謝 |
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devil_liu
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devil_liu: 金幣+5, 非常感謝。我已經(jīng)加大有機(jī)溶劑的體積，不過實(shí)驗(yàn)室沒有配備那么高轉(zhuǎn)速的離心機(jī)。。。 2014-08-18 15:36:55
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| 這個(gè)沉淀很有可能是你的濾膜溶解造成的，可以試著再加大一下有機(jī)溶劑的體積（比如4:1或5:1），另外沉淀蛋白后可不過濾膜，高速（20000g以上離心力）離心10-20 min。 |
4樓2014-08-16 08:43:05
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8樓2015-01-03 19:17:02
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