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七小艾新蟲(chóng) (小有名氣)
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雙向電泳水化上樣，溴酚藍(lán)會(huì)影響B(tài)CA法或者考馬斯亮藍(lán)法的蛋白質(zhì)定量嗎？ 已有1人參與
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雙向電泳的幾個(gè)問(wèn)題，求各位不吝賜教~~ 1、雙向電泳上樣前需要對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定量，但是水化液里有溴酚藍(lán)，請(qǐng)教各位溴酚藍(lán)是否會(huì)影響B(tài)CA法或者Bradford法的定量？ 2、BCA法受DTT干擾，那如果我是先定量，再加DTT是不是就可以用BCA法來(lái)定量？BCA法會(huì)受水化液中其他組分的影響嗎？ 3、水化液不能反復(fù)凍融，DTT要現(xiàn)加，但是DTT加的量少而且易潮解，不好稱(chēng)量，我想將DTT配成母液，用時(shí)加入母液，但有個(gè)問(wèn)題，水化液不能反復(fù)凍融，DTT是不是也不能反復(fù)凍融？DTT母液應(yīng)該怎么保藏呢？ |
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七小艾: 金幣+10, ★★★很有幫助 2014-08-31 22:08:03
七小艾: 金幣+10, ★★★很有幫助 2014-08-31 22:08:03
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1、雙向電泳上樣前需要對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定量，但是水化液里有溴酚藍(lán)，請(qǐng)教各位溴酚藍(lán)是否會(huì)影響B(tài)CA法或者Bradford法的定量？ 水化液一般不加溴酚藍(lán)。溴酚藍(lán)有顏色，當(dāng)然影響定量。 2、BCA法受DTT干擾，那如果我是先定量，再加DTT是不是就可以用BCA法來(lái)定量？BCA法會(huì)受水化液中其他組分的影響嗎？ 水化液一般不加DTT。只有在IEF前現(xiàn)配加入。 3、水化液不能反復(fù)凍融，DTT要現(xiàn)加，但是DTT加的量少而且易潮解，不好稱(chēng)量，我想將DTT配成母液，用時(shí)加入母液，但有個(gè)問(wèn)題，水化液不能反復(fù)凍融，DTT是不是也不能反復(fù)凍融？DTT母液應(yīng)該怎么保藏呢？ DTT現(xiàn)配現(xiàn)加�；蛘呱倭勘４嬖�-20C,只用一兩次。 |
2樓2014-08-30 20:24:44
七小艾
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3樓2014-08-31 22:07:49
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