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曼妥思薄荷糖新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求教：是否需要克隆測(cè)序，還是僅PCR測(cè)序就足夠了？ 已有4人參與
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| 我從環(huán)境中分分離某種目的細(xì)菌，對(duì)樣品分離純化后，提出DNA后進(jìn)行測(cè)序，是否需要克隆測(cè)序，還是僅PCR測(cè)序就足夠了？誰能給我說說兩者的區(qū)別，克隆測(cè)序是否有必要？ |
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RuyangHan
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4樓2014-08-27 22:22:01
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【答案】應(yīng)助回帖
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曼妥思薄荷糖: 金幣+18, ★★★很有幫助 2014-10-26 10:58:12
曼妥思薄荷糖: 金幣+18, ★★★很有幫助 2014-10-26 10:58:12
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PCR產(chǎn)物可以做高通量測(cè)序，不過根據(jù)方法的不同需要使用特殊的引物和加入barcode序列。 克隆測(cè)序是將PCR產(chǎn)物連接到載體質(zhì)粒上，質(zhì)粒再通過轉(zhuǎn)化進(jìn)入感受態(tài)細(xì)胞，細(xì)胞拿去涂板，形成單菌落后，挑取單菌落拿去做Sanger測(cè)序。 環(huán)境來源的PCR產(chǎn)物不可以直接拿去做傳統(tǒng)的Sanger測(cè)序，因?yàn)镻CR產(chǎn)物不是來自單一純菌，做不了Sanger測(cè)序 除非你已經(jīng)分離得到了純菌，PCR產(chǎn)物才能做Sanger測(cè)序 |
5樓2014-10-25 15:45:26
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