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曼妥思薄荷糖新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求教：是否需要克隆測序，還是僅PCR測序就足夠了？ 已有4人參與
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| 我從環(huán)境中分分離某種目的細菌，對樣品分離純化后，提出DNA后進行測序，是否需要克隆測序，還是僅PCR測序就足夠了？誰能給我說說兩者的區(qū)別，克隆測序是否有必要？ |
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dllchina
木蟲 (著名寫手)
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4樓2014-08-27 22:22:01
RuyangHan
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3樓2014-08-27 17:24:44
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曼妥思薄荷糖: 金幣+18, ★★★很有幫助 2014-10-26 10:58:12
曼妥思薄荷糖: 金幣+18, ★★★很有幫助 2014-10-26 10:58:12
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PCR產(chǎn)物可以做高通量測序，不過根據(jù)方法的不同需要使用特殊的引物和加入barcode序列。 克隆測序是將PCR產(chǎn)物連接到載體質(zhì)粒上，質(zhì)粒再通過轉(zhuǎn)化進入感受態(tài)細胞，細胞拿去涂板，形成單菌落后，挑取單菌落拿去做Sanger測序。 環(huán)境來源的PCR產(chǎn)物不可以直接拿去做傳統(tǒng)的Sanger測序，因為PCR產(chǎn)物不是來自單一純菌，做不了Sanger測序 除非你已經(jīng)分離得到了純菌，PCR產(chǎn)物才能做Sanger測序 |
5樓2014-10-25 15:45:26
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