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蛋白成功表達(dá)，卻沒(méi)有活性，換個(gè)表達(dá)系統(tǒng)有必要嗎？ 已有2人參與
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各位大蝦，求助一個(gè)問(wèn)題。 從霉菌里克隆出一段酶的基因，經(jīng)過(guò)稀有密碼子修飾，成功表達(dá)在大腸（BL21）里, 經(jīng)過(guò)sds-page檢測(cè)發(fā)現(xiàn)在上清液里的確出現(xiàn)了清晰條帶，說(shuō)明我的蛋白可以可溶性表達(dá)，但是在檢測(cè)酶的活性時(shí)，發(fā)現(xiàn)其活性極低（有，但可以忽略不計(jì)），請(qǐng)問(wèn)，有沒(méi)有必要嘗試表達(dá)在酵母系統(tǒng)里再試試。蛋白在不同的系統(tǒng)里活性會(huì)有質(zhì)的區(qū)別嗎？畢竟我是真核表達(dá)在原核里。求大家支招。謝謝。 |
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8樓2014-10-31 01:16:27
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