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well_想太多新蟲(chóng) (小有名氣)
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關(guān)于目的基因?qū)雙et-28a中是否會(huì)發(fā)生移碼問(wèn)題! 已有4人參與
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本人想用pet-28a作為表達(dá)載體,引物 已經(jīng)設(shè)計(jì)完了,才意識(shí)到移碼的問(wèn)題.想問(wèn)問(wèn)怎么看我的目的基因?qū)脒M(jìn)28a后是否會(huì)發(fā)生移碼呢?我選的酶切問(wèn)點(diǎn)分別是BamHI和HindIII, 需要看目的基因序列嗎?還是看引物?我在我的酶切位點(diǎn)前面加了2-3個(gè)保護(hù)堿基:CG GGATCC CG BamHI CCC AAGCTT GGG HindIII 引物分別是:5`>CG GGATCC CG ATGTCTCTTCGACGTATTCTC<3` 5`>CCC AAGCTT GGGTCAGCAGTACAGGTTGCC<3` 如果發(fā)生移碼了,是不是需要從新設(shè)計(jì)引物P目的基因序列? 下面是CDS序列,新手,勿怪! ATGTCTCTTC GACGTATTCT CGCGGCGGTCGCCGCCACCTTCGCCGCCACCACGGTCGCCGTGGTCGTCC CGACGCAGTCCGCCTCCGCCGCGGACTGCGTGGCGCCGTGGAACGCGAGTTCGGTCTACTGGGGCGGCAA CACCGCGTCCTACAACGGGCACAACTGGTCCGCGAAGTGGTGGACGCAGAACGAAACCCCAGGTGCAGCG CAGGTCTGGGCCGATCAGGGCGCCTGCGGCGGCGGGACGACCAACCCGCCGAACCCGTCCGGCTTCGTGG ACAGTTCAACCAGATGTTCCCGAGCCGGAATCCCTTCTACACCTACAACGGCCTGGTCAC CGCGCTCAGCGCCTACCCGGCCTTCGCGGGCACGGGCAGCGACACCGTGAAGAAGCAGGAAGCGGCGGCC TTCCTGGCGAACGTCAGCCACGAGACCGGCGGACTGGTCCACATCGTCGAGCAGAACGAAGCGAACTACC CGCACTACTGCGACACGAGCCAGTCCTACGGCTGCCCCGCCGGCAACGCCGCGTACTACGGCCGCGGCCC GATCCAGCTCAGCTGGAACTTCAACTACAAGGCCGCCGGCGACGCGCTCGGCCTGCCACTGCTGACCAAC CCGTGGCTGGTGCAGAACGACGCGGCGGTCGCCTGGAAGACCGGCATCTGGTACTGGATGACCCAGAACG GTCCCGGCACGATGACCCCGCACAACGCGATGGTCAACAGCCGCGGCTTCGGCGAGACGATCCGCAGCAT CAACGGGAGCATCGAGTGCAACGGCGGCAACCCCGCCCAGGTGCAGAGCCGCGTGAACAAGTACCAGCAG TTCACCGGCATCCTCGGCGTCACCCCCGGCGGCAACCTGTACTGCTGA |
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2樓2014-09-23 09:21:18
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