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zeroon

木蟲(chóng) (正式寫手)

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[求助] 關(guān)于克隆載體的選擇已有7人參與

大家好，在下有個(gè)關(guān)于載體選擇的問(wèn)題。是這樣的，我自己構(gòu)建了一個(gè)大約6kb長(zhǎng)的片段，這個(gè)片段上含有某菌一個(gè)基因的上下游同源臂和抗性基因標(biāo)記，主要作用是用來(lái)敲除該目的基因的。
現(xiàn)在呢，我想把這個(gè)片段連接在載體上，放在大腸桿菌中擴(kuò)增。我看了一些商用的克隆載體，基本上都是2kb大。那么我這個(gè)6kb 大的片段能連到2kb大的載體上嗎？

第二個(gè)問(wèn)題是，商用的載體種類也挺多，什么樣的載體適合呢？

謝謝了！

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1樓 2014-09-26 11:18:42

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我非子

銅蟲(chóng) (小有名氣)

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學(xué)以致用

4樓2014-09-26 15:37:20

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stone2239

鐵桿木蟲(chóng) (著名寫手)

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6k的序列肯定是可以連到2k的克隆載體上的，我曾經(jīng)做過(guò)8k的，只不過(guò)連接效率較一般小片段要低，現(xiàn)在有很多公司有專門連大片段的克隆載體，多問(wèn)問(wèn)。

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2樓2014-09-26 15:03:23

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bwangel

銀蟲(chóng) (小有名氣)

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能連，6K不算特別大

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3樓2014-09-26 15:14:20

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ccandcc

木蟲(chóng) (小有名氣)

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zeroon: 金幣+1, ★有幫助 2014-09-29 17:26:35

你要的不是表達(dá)載體所以你主要看你需要的酶切點(diǎn)載體里面包括了就行，
非表達(dá)載體比較便宜，你問(wèn)問(wèn)周圍實(shí)驗(yàn)室的興許就能要點(diǎn)

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5樓2014-09-26 16:36:32

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普通表情龍兔虎貓

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