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[求助]
為啥RT-PCR的空白對(duì)照也出現(xiàn)了目的條帶？ 已有2人參與
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做RT-PCR時(shí)，為了保證不是RNA的質(zhì)量問(wèn)題引起的失敗，在反轉(zhuǎn)錄時(shí)就做了空白對(duì)照，在一組PCR管中加的是無(wú)菌水代替RNA，其余條件均不變，最后用兩組實(shí)驗(yàn)合成的cDNA做模板，進(jìn)行PCR反應(yīng)，反應(yīng)體系及程序完全一樣，最后擴(kuò)增的結(jié)果如圖一。左一和左三是加了RNA的，左二和左四是加無(wú)菌水代替RNA的，右一是marker，奇怪的是我的目的條帶大概就在1000，這個(gè)結(jié)果差不多正確，1500bp的marker，但為啥加了無(wú)菌水代替RNA的也能出目的條帶？ 而且，樓主當(dāng)時(shí)舉得marker有些沒(méi)有跑開(kāi)，把膠又拿回去跑，最后再進(jìn)行檢測(cè)，就出現(xiàn)了圖二，左二和左四降解比較明顯。 對(duì)于這種結(jié)果，我真是醉了，現(xiàn)在完全不知道問(wèn)題出在哪里，請(qǐng)求各位大神支招，謝謝！ 2014.10.13PCR結(jié)果.jpg 2014.10.13PCR延長(zhǎng)電泳時(shí)間后的結(jié)果.jpg |
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2樓2014-10-13 17:08:27
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4樓2014-10-13 18:51:52
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6樓2014-10-13 23:45:46
7樓2014-10-14 11:09:14
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8樓2014-10-29 17:36:10
9樓2014-10-30 08:34:05
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