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jiankang87新蟲 (初入文壇)
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[求助]
急求!!各位大俠,關(guān)于轉(zhuǎn)染到動物身上的質(zhì)粒有何要求? 已有2人參與
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我最近兩次提取了pGFP(綠色熒光蛋白)質(zhì)粒,目的是將其與一種納米載體相結(jié)合,然后注入到裸小鼠體內(nèi),我采用的是天根的去內(nèi)毒素的質(zhì)粒大提試劑盒,目前已經(jīng)提過兩次,OD260/280檢測均在1.8以上。按照試劑盒要求,最后一步洗脫質(zhì)粒DNA我是在超凈臺內(nèi)采用的無菌雙蒸水。今天我同學(xué)和我說,必須先在細(xì)胞層面試一試,看看是否有污染,還要進(jìn)行下電泳測試,看看提取的是否是需要的那種質(zhì)粒。我不太明白 1.整個提取質(zhì)粒過程,除了最后一步是在超凈臺里操作的,前面的都是在空氣中操作的,那么請問這樣如何可以保證絕對無菌? 2.如何確定是否目前提出來的就是我需要的那種質(zhì)粒? 3.直接注射到裸鼠體內(nèi)的質(zhì)粒有何要求?在目前提取后還需要進(jìn)行什么特殊處理嗎? 實驗非常著急,請各位大俠不吝賜教啊。 |

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