 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1595 | 回復: 16 | ||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
電風扇魏哥金蟲 (正式寫手)
|
[求助]
雙抗夾心ELISA方法的建立 已有6人參與
|
|
|
我做雙抗夾心ELISA時遇到下面的情況，求高手指教“一抗+5%的脫脂奶粉封閉+陰陽血清及空白對照+自己標記的HRP二抗+顯色+終止“，結果陰性和空白都呈陽性，能不能幫忙分析分析是什么原因造成的？？？？？？？？？？ 一抗和二抗都是由本實驗室自己制備的！ |
回復此樓» 猜你喜歡
一志愿哈爾濱工業(yè)大學材料與化工方向336分
已經(jīng)有5人回復
-
0856材料化工調劑 總分330
已經(jīng)有9人回復
-
085602 化工專碩 338分 求調劑
已經(jīng)有9人回復
-
352分 化工與材料
已經(jīng)有4人回復
-
求調劑
已經(jīng)有8人回復
-
材料求調劑 一志愿哈工大總分298分，前三科223分
已經(jīng)有3人回復
-
材料求調劑一志愿哈工大324
已經(jīng)有4人回復
-
085600 286分 材料求調劑
已經(jīng)有4人回復
-
求調劑
已經(jīng)有7人回復
-
275求調劑
已經(jīng)有10人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- ELISA試驗不顯色，希望得到大家?guī)椭?/a>
已經(jīng)有41人回復
- 關于免疫熒光和免疫組化抗體稀釋的問題
已經(jīng)有4人回復
- 夾心ELISA幾種包被液嘗試出現(xiàn)的問題
已經(jīng)有4人回復
- 夾心ELISA，陰性值、空白值過高。
已經(jīng)有8人回復
- 兩種單抗夾心ELISA方法的建立
已經(jīng)有3人回復
- 求助，最近在做雙抗夾心法測IgG抗原濃度的實驗。
已經(jīng)有8人回復
- ELISA空白值過高
已經(jīng)有5人回復
- 雙抗體夾心ELISA的梯度濃度標準品實驗結果確無梯度變化，真心求大家?guī)兔Ψ治鲈颍?/a>
已經(jīng)有23人回復
- 雙抗體夾心ELISA，陽性孔，樣品孔和陰性對照全部不顯色，怎么回事
已經(jīng)有12人回復
- 雙抗夾心ELISA 空白值偏高
已經(jīng)有3人回復
- 雙抗體夾心ELISA，陰性值很高，怎么回事呢
已經(jīng)有41人回復
- ELISA同一樣品，稀釋倍數(shù)越高，得到結果越大？為嘛？
已經(jīng)有16人回復
- 【資料】《protocol book》《實驗程序手冊》（中文版、英文版）abcam公司資料
已經(jīng)有496人回復
- 如何破壞抗原抗體的結合
已經(jīng)有10人回復
- 【求助/交流】ELISA試驗樣品中，濃度高的樣品的OD低于濃度低的樣品的OD？
已經(jīng)有8人回復
- 【求助/交流】雙抗體夾心ELISA的空白孔該怎么設置？
已經(jīng)有6人回復
sfeqhl
鐵蟲 (正式寫手)
- 應助: 5 (幼兒園)
- 金幣: 1087.9
- 散金: 153
- 紅花: 6
- 帖子: 942
- 在線: 157.2小時
- 蟲號: 2604963
- 注冊: 2013-08-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 免疫生物學
9樓2014-11-26 08:36:59
biotech_zhou
木蟲 (著名寫手)
待人以誠：專業(yè)/專注/專心
- 應助: 373 (碩士)
- 金幣: 2037.6
- 散金: 206
- 紅花: 6
- 帖子: 1441
- 在線: 317.6小時
- 蟲號: 3078402
- 注冊: 2014-03-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫生物學
2樓2014-11-14 21:01:54
【答案】應助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
youlinglyw: 金幣+2, 贈人玫瑰手有余香，生物科學有你更精彩！ 2014-11-25 17:32:30
電風扇魏哥: 金幣+1, ★★★很有幫助 2015-05-04 14:53:43
感謝參與，應助指數(shù) +1
youlinglyw: 金幣+2, 贈人玫瑰手有余香，生物科學有你更精彩！ 2014-11-25 17:32:30
電風扇魏哥: 金幣+1, ★★★很有幫助 2015-05-04 14:53:43
|
第一，你的陰性血清是從哪里來的？這些東西不能自己隨隨便便制備，需要從正規(guī)科研所購買 第二，你的二抗是是否確實標記上了，是否驗證能否顯色，可能是你中間的步驟不合理，我們沒有看到這個關鍵的標記步驟不能隨便下結論 第三，你的顯色液是否用二抗證明有顯色，如果沒有，可取少量顯色液加入少量二抗證明之 第四，你的包被蛋白用的包被液是什么成分，一般情況下是碳酸鹽 ，另外是否證明已經(jīng)包被上了？ [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
3樓2014-11-15 07:25:59
|
空白都顯陽性首先確定你這組實驗錯誤。 原因第一：加二抗后洗了沒。 第二：如果洗了，那就說明二抗交聯(lián)上去了，有可能封閉液過期了，或者封閉液沒有封閉上(時間，溫度等）。 第三：很多時候有一些抗體會出現(xiàn)一抗與二抗直接交聯(lián)的情況（應該很上吧，但我就碰到過一次，實在洛陽百泰科買的）。 第四：你必須確定你空白是不是加錯了。 第五：顯色劑變質了，我最開始做的時候TMB自配就出現(xiàn)過這種問題，它自己都變色了。 如果你的實驗操作正確的話，應該是沒封閉好吧（或者你的脫脂奶風有問題啊，買點BSA 試試便宜的。其它原因你在做實驗的時候很容易就發(fā)現(xiàn)了。 |
4樓2014-11-18 11:14:21
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 083000學碩274求調劑 +5 | Li李魚 2026-03-26 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0703化學求調劑，各位老師看看我�。。� +5 | 祁祺祺 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
[考研] 張芳銘-中國農業(yè)大學-環(huán)境工程專碩-298 +3 | 手機用戶 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調劑 +10 | 幸運的醬醬 2026-03-22 | 12/600 |
|
|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專業(yè)總分300求調劑 +7 | 曼111 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 324求調劑 +5 | hanamiko 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 359求調劑 +4 | 王了個楠 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 327求調劑 +7 | prayer13 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調劑 +3 | 邱gl 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調劑 +17 | 碩星赴 2026-03-23 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 329分求調劑 +9 | Mr. Z 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 309求調劑 +4 | gajsj 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0854AI CV方向招收調劑 +4 | 章小魚567 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 302求調劑 +4 | 錦衣衛(wèi)藤椒 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 086003食品工程求調劑 +6 | 淼淼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化學調劑 +6 | yzysaa 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 311求調劑 +3 | 冬十三 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291求調劑 +3 | HanBeiNingZC 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 277分求調劑，跨調材料 +3 | 考研調劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|