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為什么SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳跑出來(lái)老是一條線，沒(méi)有條帶（mark也跑不出來(lái)） 已有7人參與
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用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳跑蛋白質(zhì)，不知為什么每次都跑不開，在濃縮膠的時(shí)候明顯還看見(jiàn)樣品間的間隔，但是到了分離膠就跑在一起了，就成了一條藍(lán)色的線（溴酚藍(lán)配液指示），而且跑著跑著藍(lán)色就變黃色了，在機(jī)器上讀出來(lái)只有一條亮帶，其他的就什么都沒(méi)有了，之前以為是濃度不對(duì)，所以分離膠7、5%10%15%都跑過(guò)，結(jié)果也是一樣的，樣品濃度也是稀釋前后電泳效果一樣，pH是6、8和8、9，染色的時(shí)候也加了B-巰基乙醇的。染色（用的是考然）脫色之后還是一條線，沒(méi)有任何條帶（還有就是我發(fā)現(xiàn)我的膠的顏色脫不下來(lái)，還是藍(lán)色的，以為時(shí)間不夠所以有脫過(guò)一夜但還是不行）。下面是我的膠體配方，7.5%、10%都跑過(guò)。我的蛋白質(zhì)一次都沒(méi)跑分開過(guò)，電腦上看都是只有一條亮的線，那條線就是上圖中的綠色線（以下圖做說(shuō)明），前后半月都在跑膠，可能跑了有40多塊，但是都沒(méi)有一塊分開的。前天點(diǎn)了mark，mark是新買的，還是沒(méi)有跑出來(lái)（這個(gè)是不是就證明是我膠的原因？能不能給我個(gè)膠的配方啊，詳細(xì)點(diǎn)的）。因?yàn)檫@個(gè)原因，我實(shí)驗(yàn)一直進(jìn)行不下去，好著急啊，謝謝。這些是咋回事？謝謝解答~~ 這是膠的配方 這是剛剛跑完的樣子 |
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5樓2014-12-05 09:24:22
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