 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1933 | 回復: 9 | ||
[求助]
1700基因的克隆 已有3人參與
|
|
最近在克隆一個1700bp的基因，引物是根據(jù)轉(zhuǎn)錄組序列設(shè)計的。因為是全長， 所以引物沒辦法多選，只能是起始密碼子開始，到終止密碼子，但是無論怎么P，都P不出來~然后又做了一個3’RACE，得到了終止密碼子后面的序列，根據(jù)3‘RACE的序列設(shè)計下游引物，依然P不出來~ 但是單加一個全長正（反）引物，與一個中間位置的反（正）引物一起P，可以擴增上游1300bp，下游1200bp的片段， 曾經(jīng)也拿Mix P出過一次1700的全長，但是因為是Mix，有錯配，不能用~ 以后拿LA Taq酶P，就再也消失不見了、、、、 但是能證明轉(zhuǎn)錄組序列是對的~ 求各位大神指教，這是為什么呢？下一步該怎么做呢？ 是引物的問題呢？還是模板有高級結(jié)構(gòu)呢？ |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有112人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 一個基因做TA克隆后送去測序，不同的單克隆后來結(jié)果不一致，1500bp里有的11個堿基不同
已經(jīng)有9人回復
- 一個基因DNA序列克隆的意義
已經(jīng)有4人回復
- 克隆某一功能基因的全長，要不要做Race？
已經(jīng)有7人回復
- 克隆基因為什么一直連不到載體上
已經(jīng)有11人回復
- 基因克隆失敗原因，求助！
已經(jīng)有10人回復
- 怎么使用NCBI克隆基因？
已經(jīng)有7人回復
- 如何克隆一段1200bp的真核基因，序列來自NCBI
已經(jīng)有7人回復
- 怎樣克隆基因家族中的一個特定基因
已經(jīng)有3人回復
- 新基因的克隆和熒光定量表達比較好發(fā)的SCI雜志
已經(jīng)有12人回復
- 單個基因的克隆和表達可以發(fā)在什么雜志上
已經(jīng)有4人回復
- 已知全長基因怎樣克隆并構(gòu)建表達載體
已經(jīng)有8人回復
- 已知基因全長，克隆構(gòu)建表達載體
已經(jīng)有5人回復
- 克隆基因和載體連接后轉(zhuǎn)化至大腸桿菌，為什么每次涂板都是空平板沒有菌落？
已經(jīng)有17人回復
- 【求助/交流】基因做表達實驗必須要克隆全長嗎？
已經(jīng)有7人回復
- 【求助/交流】18s克隆文庫相關(guān)問題
已經(jīng)有3人回復
- 【求助/交流】已知基因序列如何克隆獲得
已經(jīng)有18人回復
- 【求助/交流】真菌的基因克隆與表達
已經(jīng)有7人回復
- 克隆基因全長引物設(shè)計問題
已經(jīng)有32人回復
2樓2014-12-28 23:26:43
zhaodahe
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 220 (大學生)
- 金幣: 1796.6
- 紅花: 7
- 帖子: 461
- 在線: 378.5小時
- 蟲號: 552612
- 注冊: 2008-04-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳學
3樓2014-12-29 06:29:26
4樓2014-12-29 09:28:58
5樓2014-12-29 09:31:06
6樓2014-12-29 10:31:30
zhaodahe
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 220 (大學生)
- 金幣: 1796.6
- 紅花: 7
- 帖子: 461
- 在線: 378.5小時
- 蟲號: 552612
- 注冊: 2008-04-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳學
7樓2014-12-29 10:53:34
8樓2014-12-29 15:20:02
9樓2014-12-29 15:25:59
南岸青梔55
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 29.3
- 帖子: 11
- 在線: 3.2小時
- 蟲號: 14593377
- 注冊: 2019-03-13
- 專業(yè): 細胞增殖、生長與分化
10樓2019-09-17 16:03:07
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 小六琦琦 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 305分求調(diào)劑（食品工程） +3 | Sxy112 2026-03-21 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 08工科 320總分 求調(diào)劑 +7 | 梨花珞晚風 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[基金申請] 山東省面上項目限額評審 +4 | 石瑞0426 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +5 | 金恩貝 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +5 | 諾貝爾化學獎覬?/a> 2026-03-15 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703化學297求調(diào)劑 +3 | Daisy☆ 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | 某某某某位 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | .m.. 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +5 | 紅衣隱官 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | Ma_xt 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 華東師范大學-071000生物學-293分-求調(diào)劑 +3 | 研究生何瑤明 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學，080502，354分求調(diào)劑 +5 | 守候夕陽CF 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +16 | 于海海海海 2026-03-19 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 材料學碩297已過四六級求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料學求調(diào)劑 +4 | Stella_Yao 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +9 | 大可digkids 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑 +7 | 為學666 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|