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BBMC-2012木蟲 (知名作家)
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[求助]
cDNA克隆問題，怎么拉全長出來 已有1人參與
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| 樓主是個菜鳥剛接觸。我現(xiàn)在想得到一個基因cDNA全長，我提取RNA反轉(zhuǎn)錄后，做RACE。這樣做后不是只有一段一段產(chǎn)物，但沒有全長產(chǎn)物。親們知道這個全長產(chǎn)物怎么操作得到的嗎？我以后想把這個基因克隆出來，轉(zhuǎn)染用！ |
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做3`-和5`-RACE的目的就是獲取基因cDNA全長序列的兩端序列，然后拼接獲得完整的cDNA全長序列，有了全長序列后，根據(jù)你想擴(kuò)增的片段，比如完整閱讀框，設(shè)計(jì)上下游引物，用3`-RACE的模板或重新提RNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板進(jìn)行PCR就獲得了你要的基因，之后就可以構(gòu)建質(zhì)粒往下做實(shí)驗(yàn)了。 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
3樓2015-01-09 00:43:46
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4樓2015-01-09 00:49:04
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5樓2015-01-09 08:39:31
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