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關(guān)于羧基聚苯乙烯微球偶聯(lián)抗體后的穩(wěn)定性問題 已有1人參與
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| 0.2um的羧基聚苯乙烯微球，通過EDC活化后偶聯(lián)一個(gè)抗體，微球抗體復(fù)合物4度保存穩(wěn)定性差。主要是4度保存后熒光信號(hào)會(huì)明顯高于剛稀釋好的微球的熒光信號(hào)，分析原因是聚苯乙烯微球的疏水作用，靜電作用等可能導(dǎo)致微球包被抗體后發(fā)生部分凝集（肉眼不可見的凝集），通過優(yōu)化標(biāo)記抗體的濃度，緩沖液pH，EDC用量等均未能改變微球抗體復(fù)合物4度保存熒光信號(hào)升高的問題，望各位蟲友給點(diǎn)好建議啊！如何穩(wěn)定保存！ |
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youjihuaxue2000
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9樓2015-09-17 17:20:02
youjihuaxue2000
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【答案】應(yīng)助回帖
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王雨云: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝！ 2015-02-02 12:59:55
王雨云: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝！ 2015-02-02 12:59:55
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200nm熒光，你是做免疫層析嗎？造成不穩(wěn)定的原因復(fù)雜，但都能歸結(jié)為微球表面電荷被平衡掉了。兩微球靠彼此之間的電荷斥力分開，使整個(gè)體系維持溶膠狀態(tài)。從EDC的加入開始，這種電荷平衡就被打破，后面加入抗體、封閉劑的時(shí)候，如果不能回復(fù)電荷平衡，體系就是不穩(wěn)定的。所以，不妨試試：（1）選擇表面電荷更多的微球，EDC只活化部分羧基，剩下部分來提供負(fù)電荷；（2）選擇帶同種電荷的blocker。（3）還得找個(gè)有經(jīng)驗(yàn)的人手把手教你，細(xì)節(jié)很重要，呵呵。 歡迎交流huxuhua2008@163.com [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
2樓2015-02-02 08:00:03
3樓2015-02-02 13:21:12
youjihuaxue2000
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4樓2015-02-03 07:44:46
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