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anona銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
DNA OD值260/230<1 已有2人參與
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師兄四個(gè)月之前提取的腸道微生物DNA,保存在負(fù)20度,濃度在50~300,OD260/280在2~2.2,,OD260/230在2~3之間,現(xiàn)在我準(zhǔn)備做熒光定量PCR,檢測(cè)DNA260/230都<1,260/280在2.1~2.3之間,求助,實(shí)驗(yàn)還能做嗎?有什么補(bǔ)救的方法嗎?小白求指教。![]() ![]() ![]() |
木蟲 (著名寫手)
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沒事,接著做。260/280在2.1~2.3之間這個(gè)正常就行。 A260/A280和A260/A230 是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應(yīng)該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物、鹽(胍鹽)等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0 。 當(dāng) 0.5%BSA蛋白質(zhì)污染時(shí),蛋白污染會(huì)導(dǎo)致260和280的數(shù)值都下降,其凈結(jié)果是260/280比值下降,但260/280的比值變化并不顯著,正如分子克隆3所說。但蛋白殘留會(huì)導(dǎo)致230的數(shù)值顯著上升,顯著影響260/230的比值。也就是說,如果RNA樣品的260/280=1.7,260 /230=0.5,那么就應(yīng)該考慮污染原因不是胍鹽殘留,而是蛋白殘留 |

銅蟲 (初入文壇)
銅蟲 (初入文壇)
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