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jingmi新蟲 (正式寫手)
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[求助]
多重PCR的引物設(shè)計(jì) 已有2人參與
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比如，我要一次性檢測(cè)5種細(xì)菌。 要怎么設(shè)計(jì)引物呢？ |
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那是我的-
銅蟲 (小有名氣)
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設(shè)計(jì)五種引物，進(jìn)行多重PCR，如果一種一種檢測(cè)的話，需要進(jìn)行五次PCR反應(yīng)，太耗時(shí)耗力了。所以一次性設(shè)計(jì)五對(duì)引物，進(jìn)行多重PCR的話，可以將你要檢測(cè)的細(xì)菌一次全部檢測(cè)出來。 不過五對(duì)引物的PCR，對(duì)引物的要求較高，需要專門的軟件設(shè)計(jì)、檢測(cè)。同時(shí)對(duì)反應(yīng)的特異性也要求很高，尤其是酶，不要使用普通的Taq酶，使用普通Taq可定不會(huì)得到好的結(jié)果。建議使用特異性好的熱啟動(dòng)Taq酶，如果模板不超過10kb的話，也不建議使用高保真酶。個(gè)人推薦 Relia熱啟動(dòng)Taq酶，擴(kuò)增人類基因組的6個(gè)區(qū)域，特異性很好。 http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html 希望對(duì)你有所幫助。  |
4樓2015-01-13 11:17:34
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