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yjhuan

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[求助] Western Blot中的問(wèn)題已有5人參與

跑蛋白時(shí)經(jīng)常出現(xiàn)條帶相連的情況，求大神幫忙解釋一下問(wèn)題出在哪里，還有第二個(gè)圖是什么原因？膠的問(wèn)題還是蛋白的問(wèn)題

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1樓 2015-01-29 19:09:40

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yjhuan

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2樓: Originally posted by bluesea000 at 2015-01-29 19:20:47
我以前也跑過(guò)這種圖，圖1可能是上樣量太多，而且loading質(zhì)量不太好，蛋白加完loading處理后13000rpm/min離心2-3min，再跑應(yīng)該會(huì)好點(diǎn)。
圖2應(yīng)該是電泳液的問(wèn)題，電泳和轉(zhuǎn)膜液全部新配，試試看~

謝謝

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4樓2015-01-29 21:54:42

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bluesea000

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西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-01-29 23:08:14

我以前也跑過(guò)這種圖，圖1可能是上樣量太多，而且loading質(zhì)量不太好，蛋白加完loading處理后13000rpm/min離心2-3min，再跑應(yīng)該會(huì)好點(diǎn)。
圖2應(yīng)該是電泳液的問(wèn)題，電泳和轉(zhuǎn)膜液全部新配，試試看~

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yjhuan

2樓2015-01-29 19:20:47

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logowang

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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-01-29 23:08:36

適當(dāng)?shù)慕档碗妷海袟l件的話在 4 度冷柜里跑，沒(méi)條件的話把整個(gè)電泳盒放在大冰盒里跑，問(wèn)題是在跑膠和后續(xù)的wb實(shí)驗(yàn)關(guān)系不大，先摸索跑膠條件吧。

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3樓2015-01-29 19:20:52

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引用回帖:

3樓: Originally posted by logowang at 2015-01-29 19:20:52
適當(dāng)?shù)慕档碗妷�，有條件的話在 4 度冷柜里跑，沒(méi)條件的話把整個(gè)電泳盒放在大冰盒里跑，問(wèn)題是在跑膠和后續(xù)的wb實(shí)驗(yàn)關(guān)系不大，先摸索跑膠條件吧。

嗯嗯，我試試，謝謝啦

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5樓2015-01-29 21:55:11

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