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lazyren鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
向各位有經(jīng)驗(yàn)者求助，提取DNA問題 已有3人參與
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除了白-4是外類群，其他均為同一屬植物，其為灌木或喬木 實(shí)驗(yàn)方法是： 1.取樣約0.02g，液氮研磨 2.CTAB 800微升+巰基乙醇15微升，65攝氏度溫浴1小時(shí) 3.氯仿：異戊醇（24：1）洗兩次，離心12000rpm，10分鐘，輕搖乳化10分鐘，冰浴15分鐘 4.取上清，加入5M NaCl體積為上清1/5, 異丙醇（-20攝氏度）等體積加入（即上清+NaCl），冰凍3h，離心10000rpm,10分鐘 5.冰凍的75%乙醇（-20攝氏度）洗兩次，加500微升，離心10000rpm，10min,冰凍無水乙醇洗一次，加200微升，離心，晾干30分鐘 6.TE加50微升+RNase(0.1mg/ml) 2微升，溫浴37攝氏度 1小時(shí) 電泳 1%的瓊脂糖凝膠，goldview 2微升/40微升TBE與瓊脂糖混合液 70v，1.5h 以上，做了幾次，感覺還是降解，請問有朋友能提點(diǎn)提點(diǎn)嗎？ 20150129(5).jpg |
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lazyren
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5樓2015-01-30 11:34:52
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