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504775490金蟲 (知名作家)
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提取肌肉組織RNA為什么總是降解？求助��！ 已有2人參與
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提取大鼠肌肉組織RNA為什么總是降解��？求助，求助！ 樣本都是取新鮮組織后干冰速凍，1小時(shí)以內(nèi)回到實(shí)驗(yàn)室提取RNA。 trizol乙醇沉淀的方法提取的，最后70ulDEPC水溶解，過程中用到的吸頭，離心管，器械，液氮研磨缽都滅過菌，為什么電泳處圖還是這么降解嚴(yán)重？ 電泳條件130V,20min,上樣5ul電泳過程用的TAE沒有進(jìn)行DEPC處理，難道就是因?yàn)殡娪具@一步?jīng)]用DEPC處理就成這樣了嗎？ 出現(xiàn)這樣的結(jié)果是提取RNA的問題？還是電泳過程的問題？還是樣本的問題？求大俠們幫幫忙！ RNA提取電泳圖.png |
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ice-bamboo
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4樓2016-02-18 08:35:28
a314919473
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【答案】應(yīng)助回帖
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從電泳圖片看可能是以下問題： 1.取樣問題 取樣應(yīng)該是大鼠處死1分鐘內(nèi)，將組織放入液氮內(nèi)速凍，比干冰速凍效果好。 3顆星 2.電泳問題 電泳需要不需DEPC處理，但是需要現(xiàn)配的電泳緩沖液，最長(zhǎng)時(shí)間不宜超過3天。 2顆星 3.試劑問題 所涉及的70%乙醇，建議現(xiàn)配先用，超凈臺(tái)吹干可能需要10-30分鐘，建議使用過柱法，只需超凈臺(tái)吹5-10分鐘。 1顆星 |
2樓2015-02-11 11:00:58
親叫我石頭
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3樓2015-02-11 11:07:55
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