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laqiwe鐵蟲 (正式寫手)
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關(guān)于經(jīng)典分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中用量的問題 已有2人參與
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1.質(zhì)粒試劑盒小提濃度一般為多少？ 2.DNA電泳上樣量為多少？Marker一般上樣多少？ 3.質(zhì)粒雙酶切DNA加量多少？ 4.連接體系目的DNA和載體質(zhì)量多少？ 5.瓊脂凝膠有那些種常見的上樣孔，分別能上樣多少體積？ |
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peitaokong
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3樓2016-12-27 20:11:17
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【答案】應(yīng)助回帖
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1.質(zhì)粒試劑盒小提濃度一般為多少？ 最近要送樣測序，技術(shù)那邊說 滿足150ng/ml就夠了，一般我提能提到400~500mg/ml A260/A280 A260/A230 都在2左右 2.DNA電泳上樣量為多少？Marker一般上樣多少？ 看具體是做什么實(shí)驗(yàn)，樣品梳子規(guī)格 最大加樣量 0.75 mm9 teeth 15μl ，0.75 mm17 teeth 6.5μl ，1.50 mm9 teeth 30μl ，1.50 mm 17 teeth 13μl，這個(gè)是我百度一下找到的，一般實(shí)驗(yàn)室的還真沒具體查過大小·····就最小的 2μl就夠了，mark也2μl。然后中等的梳子10μl mark 5μl 。最大的做膠回收的梳子，一次最多可以加樣150 μl ，但是跑膠一般mark 5μl~8μl感覺足夠啦。 3.質(zhì)粒雙酶切DNA加量多少？ 這個(gè)沒做過 4.連接體系目的DNA和載體質(zhì)量多少？ 沒做過 5.瓊脂凝膠有那些種常見的上樣孔，分別能上樣多少體積？ 這個(gè)問題基本上第二個(gè)回答過啦~看你具體下一步要做什么，普通驗(yàn)證，用小孔 加樣2μl就夠了。膠回收要多一點(diǎn)，中等梳子加50μl，大梳子加150μl 如果有錯(cuò)誤，歡迎糾錯(cuò)啊。 |
2樓2016-12-27 16:16:42
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