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mafang68金蟲 (著名寫手)
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HRP標記抗體的非特異性反應 已有3人參與
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本人做ELISA試劑盒研發(fā),讓別的公司定制的單抗并標記的HRP,現(xiàn)在問題就出在HRP標記抗體的非特異性反應上,先說說實驗方法和結果 方法:目的蛋白、非目標蛋白、PBS包被;封閉;加HRP標記抗體反應;顯色;檢測OD值。 結果:1。與目的蛋白反應很低,OD值在0.2左右;非目標蛋白的反應較高,OD值在0.6左右。(此為同一次實驗的檢測結果) 2. 復檢HRP標記抗體與非目標蛋白反應,OD值仍很高,0.7左右。 3. 另包被PBS,與HRP標記抗體溫育,竟然也顯色,而且很高,OD值在1.1左右。 以上結果,不知道怎么解釋,或是哪步出了問題,與廠家溝通他們也不知怎么回事。希望各位蟲友不吝賜教!非常感謝! |
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