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mafang68金蟲 (著名寫手)
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[求助]
HRP標記抗體的非特異性反應(yīng) 已有3人參與
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本人做ELISA試劑盒研發(fā)，讓別的公司定制的單抗并標記的HRP，現(xiàn)在問題就出在HRP標記抗體的非特異性反應(yīng)上，先說說實驗方法和結(jié)果 方法：目的蛋白、非目標蛋白、PBS包被；封閉；加HRP標記抗體反應(yīng)；顯色；檢測OD值。 結(jié)果：1。與目的蛋白反應(yīng)很低，OD值在0.2左右；非目標蛋白的反應(yīng)較高，OD值在0.6左右。（此為同一次實驗的檢測結(jié)果） 2. 復(fù)檢HRP標記抗體與非目標蛋白反應(yīng)，OD值仍很高，0.7左右。 3. 另包被PBS，與HRP標記抗體溫育，竟然也顯色，而且很高，OD值在1.1左右。 以上結(jié)果，不知道怎么解釋，或是哪步出了問題，與廠家溝通他們也不知怎么回事。希望各位蟲友不吝賜教！非常感謝！ |
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