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sassfras捐助貴賓 (初入文壇)
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[求助]
SSR聚丙烯酰胺凝膠分析
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最近我在做樟科植物檫木的SSR分子標(biāo)記（提取DNA的材料是7月分的檫木硅膠干燥葉片，DNA很難提取，提取效果不好），我的PCR體系為94度預(yù)變性3分鐘、94度變性30秒、退火時(shí)間30秒、72度延伸30秒、72度延伸7分鐘、35個(gè)循環(huán)、退火溫度是按已有的文章相同的引物所設(shè)定的溫度，物質(zhì)濃度MgCl2：1，DNA模板：1.5，Taq:0.3，10*PCR BUffer：1.5，去離子水：7.7，dNTP：1，引物：2.我所用膠是8%的聚丙烯酰胺凝膠，電壓180伏。但是，我經(jīng)常跑膠要跑4個(gè)小時(shí)，而且出來(lái)的效果很不好，或則跑不出來(lái)，帶經(jīng)常還跑偏。求助各位大神給予指點(diǎn)。 2.jpg 3.17.jpg |
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wanglei8851
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2樓2015-03-26 08:58:09
sassfras
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3樓2015-03-28 20:59:10
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