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[求助]
高效液相同一出峰時間樣品與標(biāo)準(zhǔn)品光譜圖不同，怎么回事呢？ 已有1人參與
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| 用高效液相測量樣品鬼臼毒素和4’-去甲基鬼臼毒素的含量，結(jié)果在4‘-去甲基鬼臼毒素出峰時間處，樣品的光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品不同，前半截基本相同，但在380nm處比標(biāo)準(zhǔn)品多了一個吸收峰。備注：標(biāo)準(zhǔn)品是用1/5乙腈配置，樣品采用甲醇超聲提取，都是采用高效液相進行梯度洗脫，流動相為甲醇。相同出峰時間光譜圖卻不同，是怎么回事呢？是因為標(biāo)準(zhǔn)品與樣品的溶劑相不同造成的嗎？另外，這兩個標(biāo)準(zhǔn)品的光譜圖非常類似，這正常嗎？是因為兩種物質(zhì)僅是相差一個甲基的原因嗎？對這個實在是不懂，請教大神們幫忙分析下~ |
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old_yang
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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寒露攜陽: 金幣+20, ★★★很有幫助 2015-04-04 22:24:22
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你的這兩種藥物不是同一個物質(zhì)，紫外吸收不可能完全重合，如果完全重合了，也很難說明它們就是一種物質(zhì)，紫外畢竟只是一種分析手段而已。比較保留時間的差異，你的這兩個物質(zhì)在你的實驗條件下是同時出峰了，但如果你換不同的色譜柱，或者改變洗脫條件，它們的保留時間是不同的。你用過手性柱沒有，可以分離異構(gòu)體的。 你的這兩個還差了一個甲基，有差異很正常。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
2樓2015-04-03 08:45:40
送紅花一朵 | 大神，我后來在樣品中加入了一點標(biāo)準(zhǔn)品，結(jié)果在4‘-去甲基鬼臼毒素出峰時間上樣品和標(biāo)準(zhǔn)品相同了，原來的那個不一樣的峰不見了，這兩種標(biāo)準(zhǔn)品出峰時間相差5min左右，應(yīng)該是完全分離開了。兩種標(biāo)準(zhǔn)品做了混標(biāo)和單標(biāo)，兩種單標(biāo)出峰時間與混標(biāo)時間完全對應(yīng)，說明標(biāo)準(zhǔn)品確實沒問題。PS：在樣品圖中，在4‘-去甲基鬼臼毒素對應(yīng)的出峰時間前幾分鐘有一個峰的光譜與標(biāo)準(zhǔn)品4‘-去甲基鬼臼毒素很像，是它提前出來了么？但是加了標(biāo)樣后還是在對應(yīng)時間出的呀？洗脫條件如果需要調(diào)的話該怎么調(diào)呢？在對應(yīng)的時間增加梯度么？ |
3樓2015-04-03 09:03:12
送紅花一朵 |
大神，我后來在樣品中加入了一點標(biāo)準(zhǔn)品，結(jié)果在4‘-去甲基鬼臼毒素出峰時間上樣品和標(biāo)準(zhǔn)品相同了，原來的那個不一樣的峰不見了，這兩種標(biāo)準(zhǔn)品出峰時間相差5min左右，應(yīng)該是完全分離開了。兩種標(biāo)準(zhǔn)品做了混標(biāo)和單標(biāo)，兩種單標(biāo)出峰時間與混標(biāo)時間完全對應(yīng)，說明標(biāo)準(zhǔn)品確實沒問題。PS：在樣品圖中，在4‘-去甲基鬼臼毒素對應(yīng)的出峰時間前幾分鐘有一個峰的光譜與標(biāo)準(zhǔn)品4‘-去甲基鬼臼毒素很像，是它提前出來了么？但是加了標(biāo)樣后還是在對應(yīng)時間出的呀？洗脫條件如果需要調(diào)的話該怎么調(diào)呢？在對應(yīng)的時間增加梯度么？ |
4樓2015-04-03 09:03:38
archbishop
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5樓2015-04-03 11:36:14
6樓2015-04-04 22:23:38
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