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siyuansing銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
真菌破碎方法 已有5人參與
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需要破碎真菌，提取胞內(nèi)的小分子化合物，做定量分析，找到了幾種方法： 1.超生破碎，查了挺多資料，有說超生破碎的效果很差，不能夠破碎完全； 2.液氮研磨，師兄說液氮研磨是最好的破碎細(xì)胞的方法，能夠破碎完全，不知道具體情況如何； 3.堿裂解，操作復(fù)雜，耗時(shí)較長(zhǎng)。 還請(qǐng)各位大神幫忙分析一下幾種破碎方法的優(yōu)劣，謝謝各位了！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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siyuansing: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2015-04-13 21:50:39
siyuansing: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2015-04-13 21:50:39
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我之前提取酵母的mRNA和內(nèi)源蛋白時(shí)候用的是玻璃珠+多樣品組織研磨機(jī)破碎細(xì)胞的。我提取的樣品比較多，所以都是把酵母放EP管然后成批研磨的~效果杠杠的 用超聲做的話，要考慮升溫問題，麻煩，而且出來的破碎效果還不好，很多破碎不完全的。。。 堿裂解最坑了。。做少量樣品測(cè)試的時(shí)候試了下，操作超級(jí)麻煩，產(chǎn)量還不高。。。果斷放棄了~ 還試過用酶的，蛋白質(zhì)搞到失活了這種傷心事我就不說了T^T 反正實(shí)驗(yàn)室有條件的話，我還是推薦用玻璃珠+多樣品組織研磨機(jī)破壁咯~ |
8樓2015-04-13 17:49:55
浴火月
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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3樓2015-04-09 02:13:27
Freedomqqc
鐵蟲 (小有名氣)
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5樓2015-04-09 10:19:05
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